馬錢子的鑒別方法
- 理化鑒別
1.取胚乳切片，加硫釩酸1滴，顯藍紫色（番木鱉堿反應(yīng)）；另取切片加濃硝酸，顯橙紅色（馬錢子堿反應(yīng)）。
2.取該品粗粉1 g,加乙醇15 ml,冷浸2小時，濾液蒸干，以1N鹽酸溶解，加氫氧化銨堿化，氯仿提取，氯仿液再用1N鹽酸提取，酸液中加鋅粉及濃鹽酸，水浴加熱5分鐘，冷卻后加亞硝酸溶液1滴，即顯櫻紅色 （番木鱉堿反應(yīng)）．
3.薄層層析：⑴ 馬錢子堿。⑵ 番木鱉堿。⑶ 馬錢子（對照藥材）。⑷ 云南馬錢（對照藥材）。⑸ 馬錢子（商品）。⑹ 制馬錢。
樣 品 液：取粉末0.5 g,加氯仿-乙醇（10∶1）混合液5 ml及濃氨水溶液0.5 ml,振搖5分鐘，放置2小時，濾液供試；
對照品液：另取番木鱉堿，馬錢子堿加氯仿溶解，制成每1 ml各含2 mg的混合液作對照溶液．
展 開：取10μl分別點樣于同一硅膠G板上，用甲苯-丙酮-乙醇-濃氨溶液展開．
顯 色：噴稀碘化鉍鉀試液,對照品顯兩橙色斑點，馬錢子堿在下方，番木鱉堿在上方，供試品顯相同的色斑。
含量測定
用高效液相色譜法測定．色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：用硅膠為填充劑；正己烷－二氯甲烷一甲醇一濃氨試液（42.5:42.5:5:0.35）為流動相；檢測波長為254nm．理論板數(shù)按士的寧峰計算應(yīng)不低于2000．
對照品溶液的制備：精密稱取士的寧對照品適量，加醋酸乙酷制成每1ml含0.4mg的溶液，供試品溶液的制備：取該品粉末（過三號篩）約0.5g,精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加氯仿25ml與濃氨試液1ml,密塞，輕輕振搖，稱定重量，放置24小時，再稱定重量，用氯仿補足減失的重量，充分振搖，濾過，精密量取濾液10ml,置分液漏斗中，用硫酸溶液（3→100）提取5次，每次15ml,合并硫酸液，加濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至9～10,用氯仿提取5次，每次20ml,合并氯仿液，蒸干，殘渣加醋酸乙酯溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，即得．
測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各4μl,注人液相色譜儀，測定，即得．該品按干燥品計算，含士的寧（C21H22N2O2）應(yīng)為1.20%～2.20%．
顯微鑒定
種子橫切面：種皮表皮細胞分化成單細胞毛，向一側(cè)斜伸，長500～ 1100μm，寬約 25μm以上，其部膨大，似石細胞狀，直徑約75μm，壁極厚，強木化，有縱長扭曲的紋孔，毛的體部肋狀木化增厚，胸腔斷面觀類圓形；種皮內(nèi)層為舫的棕色薄壁細胸，內(nèi)胚乳細胞壁厚約25μm ，胞間連絲隱約可見，以碘液處理后較明顯，細胞內(nèi)含脂肪油滴及糊粉粒。
粉末：灰黃色。
①非腺毛單細胞，大多斷裂，完整者長至1100μm，直徑25～63μm，壁強木化，基部似石細胞狀，壁極厚，紋孔縱裂縫狀，毛體部向一方倒伏，圓柱形，頂端鈍圓，有 5～18條肋狀增厚，易縱裂成裂片，宛如纖維，單個裂片直徑3～9μm，有的裂片再 2～ 3不完全縱裂。
②內(nèi)胚乳細胞多角形、長多角形或類圓形，壁較厚或甚厚，隱約可見極細密的孔溝，有的胞間層呈細波狀彎曲，內(nèi)含脂肪油滴、糊粉粒。此外有色素層（種皮內(nèi)層細胞）。該品以個大飽滿、質(zhì)堅肉厚、 色灰黃、有光澤者為佳?！吨腥A人民共和國藥典》1995 年版規(guī)定，該品以干燥品計算，含番木鱉堿應(yīng)為1.20%～2.20%。
化學(xué)鑒定
⑴取胚乳切片，加硫釩酸1滴，顯藍紫色（番木鱉堿反應(yīng)）；另取切片加濃硝酸，顯橙紅色。（馬錢子堿反應(yīng)）
⑵取馬錢子粗粉1g，加乙醇15ml，冷浸2h，濾液蒸干，加1mol/L鹽酸溶解，以氧氫化銨試液堿化，氯仿提取，氯仿液再以1mol/L鹽酸提取，酸液中加鋅粉及濃鹽酸，水浴加熱5min，冷后加亞硝酸溶液1滴，即顯櫻紅色。（番木鱉堿反應(yīng)）
（3）薄層層析：取粉末0.5g，加氯仿-乙醇（10:1)混合液5ml及濃氨水溶液0.5ml，振搖5min，放置2h，濾液供試，另取番木鱉堿、馬錢子堿加氯仿溶解，制成每1ml各含2mg的混合液作對照。各取10μl分別點樣于同一硅膠G板上，以甲苯-丙酮-乙醇-濃氨溶液（40:50:6:4) 展開15cm，取出晾干，噴以稀碘化鉍試液，對照品顯兩橙色斑點，馬錢子堿在下方，番木鱉堿在上方，供試品顯相同的色斑。
【附注】：同屬植物云南馬錢S.pierriana A.W.Hill.的種子亦作馬錢子入藥。
化學(xué)成分
馬錢種子含多種生物堿，可分為三種類型：
①“正”系列（normal series ）生物堿：番木鱉堿（strychnine），馬錢子堿（brucine），異番木鱉堿（isostrychnine），異馬錢子堿（isobrucine），番木鱉堿N-氧化物（strychnine N－oxide），馬錢子堿N-氧化物（brucine N－oxide），β-可魯勃林（β－colubrine），16-羥基-β-可魯勃林（16－h(huán)ydroxy-β-colubrine），16-羥基-α-可魯勃林。
②“偽”系列（pseudo series ）生物堿：偽番木鱉堿（pseudo-strychnine），偽馬錢子堿（pseudobrucine）。
③“N”-甲基偽”系列（N－methylpseudo series）
生物堿：N-甲基-斷-偽番木鱉堿（icajine），番木鱉次堿（vomicine），N-甲基-斷-偽馬錢子堿（no-vacine）。
種子所含生物堿以“正”系列為主[1-3]。種子經(jīng)高溫加熱（220～260℃，3min），劇毒成分番木鱉堿、馬錢子堿含量明顯降低，而異番木鱉堿、異馬錢子堿、番木鱉堿N-氧化物及馬錢子堿N-氧化物含量增高。
根皮、根木質(zhì)部含“正”系列生物堿為主，莖皮含“偽”及“N-甲基偽”系列生物堿為主，葉則含“N-甲基偽”系列生物堿為主。果皮、果肉均含番木鱉堿，馬錢子堿，4-羥基番木鱉堿（4-hydroxystrychnine），番木鱉堿N-氧化物，馬錢子堿N-氧化物，偽番木鱉堿，偽馬錢子堿，N-甲基-斷-偽番木鱉堿，番木鱉次堿，N-甲基-斷-偽馬錢子堿，果肉另含β-可魯勃林。果肉還含環(huán)烯醚單萜類（iridoid）化合物：馬錢子甙（loganin），馬錢子甙酸（lo－ganic acid），去氧馬錢子甙（deoxyloganin），馬錢子酮甙（ketolo－ganin），開鏈馬錢子甙（secologanin）。
長籽馬錢種子含多種生物堿，可分為三種類型：
①“正”系列生物堿：4-羥基-3-甲氧基-番木鱉堿（4- hydroxy－3－methoxystrychnine），番木鱉堿，馬錢子堿，4-羥基番木鱉堿，番木鱉堿N-氧化物，α-可魯勃林。
②“偽”系列生物堿：偽番木鱉堿，偽馬錢子堿。
③“N-甲基偽”系列生物堿：N-甲基-斷-偽番木鱉堿，番木鱉次堿，N-甲基-斷-偽馬錢子堿及4-羥基-3-甲氧基-N-甲基-斷-偽番木鱉堿（4－h(huán)ydroxy－3－methoxy-N－methyl-sec－pseu－dostrychnine）。
種子所含生物堿以“正”系列為主[5]葉則含“N-甲基偽”系列生物堿為主。
此外，葉還含有N-氰基-斷-偽番木鱉堿（N-cyano-sec－pseudostrychnine）及N-氰基-斷-偽馬錢子堿（N－cyano-sec-pseu－dobrucine）
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